狗狗传染性肝病吃什么药?
犬的传染性肝炎(Infectious Hepatitis,IH)是由黄病毒科瘟热病毒属的病毒引起的急性接触性传染病,以高热、黄疸和肝脏肿大为主要特征[1]。该病传染性强,传播迅速,死亡率较高,对犬业界危害极大[2-3]目前尚无有效治疗药物,主要采取隔离及支持疗法等预防措施进行防控[4-5]。因此开发安全有效的防治犬传染性肝炎的新型疫苗以及研究其发病机制具有重要意义。
一、犬传染性肝炎流行病学 在自然条件下,本病的流行没有明显的季节性,一年四季都可发生;各种年龄的犬均可感染[6]。本病通过接触粪便或饲料等污染物而传播,主要通过消化道途径感染[7]。母源抗体的存在可以阻断幼犬经哺乳而获得的感染[8],且抗体水平可以维持至少6个月之久[9]。有研究认为,当犬只群饲养的情况下,犬种间免疫抑制的存在增加了易感狗与传染源之间接触的机会,从而使得本病更容易发生和传播[10]。 犬场中,在发病高峰期,患病率可达50%~90%,病死率可高达70 %以上[11-12],给养犬业带来巨大损失。
二、犬传染性肝炎病理变化 患犬通常突然发病,体温升高到40~41℃,持续一周左右;呕吐腹泻,粪便稀软或呈水样。常出现厌食现象,有些患病幼犬还会出现精神抑郁的现象。由于胆汁淤积,肝区触诊敏感,脾脏轻度肿大;患犬眼睛、口腔粘膜、舌面、牙龈等处均可见发黄的迹象,严重的患犬会出现角膜溃疡甚至导致失明,有的患犬还会出现贫血的症状 [13-14]。
三、病原学鉴定 本实验采用直接荧光抗体技术,取1mL血液涂片,固定后加入用FHV-1 阳性血清1:100稀释的抗原液,充分混匀后置室温下作用2 h,再分别滴加等量羊抗鼠IgG-FITC 和磷酸盐缓冲液(PBS)作为阴性对照,最后用水洗去未结合的荧光素,风干,油镜下观察并拍照结果如图1所示,可见细胞质中出现明亮的绿色颗粒,说明血清中所含抗体能够有效识别犬传染性肝炎病毒,由此确定患犬感染了犬传染性肝炎病毒。
四、诊断方法 酶联免疫吸附试验 ELISA)是常用的检测病原体蛋白质抗原的方法之一,具有操作简便、灵敏度高、特异性好的特点。ELISA的原理是抗原或抗体与固相载体表面结合,使含有抗原或抗体的溶液与固相载体表面上所附着的抗原或抗体起反应,然后以洗液洗涤被吸附于固相载体的抗原或抗体,去除游离的抗原或抗体,再加入酶标记抗原或抗体,经过洗涤后将受测定物质和酶标抗原或抗体分离,并用底物显色反应来定性判断是否含有待测物[16-17]。
将收集的犬血清分为五份,每份20μL,分别置于2个EIA板上,一个作阳性对照,一个做阴性对照。另取健康犬血清为参比值,同时作试剂空白对照,具体操如下:
1. 包被:向EIA板孔内各注入100 μL FHV-1阳性血清,置37 °C孵育2h,再用含0. 1% Tween-20 PBS洗涤3次,每次振荡1min;
2. 封闭:用含1%牛血清白蛋白(BSA)的0. 1% Tween-2o PBS 封闭20 min, 然后再用含0. 1% Tween- 20 PBs冲洗3次,每次振荡1min; 3. 加待检样品:取100ul待检血清,按1:10倍梯度稀释至1:2×10°,分别取100μuL加入已包被好抗原的孔中,置37 °C孵育2 h,然后用相同PBs洗涤3次;
4. 加酶标抗体:同上法加入HRP标记的兔抗犬IgG,37 °C孵育2 h,后用PBs洗涤3次;
5. 底物液显色:向各孔内加入底物TMB 显色剂100μl,置暗处反应15~20 min,最后加终止溶液100 μL,并在酶标仪450 nm处测定光吸收值。 结果 见图2, 由图可知待检样品的光吸收值为0. 124 ± 0. 058,阴性对照组的光吸收值为0. 045±0. 020,阳性和阴性对照组间差异显著(p <0. 05),表明该试
剂盒具有良好的特异性;而待检样本的光吸收值为0. 124±0. 058,与阳性对照组的0. 179 ±0. 014接近但低于阳性对照,这表明该试剂盒具有很好的敏感性。所以该试剂盒可用于犬传染性肝炎病毒的检测。
参考文献:
[1] 张春红, 李玉华 , 陈雪飞 , 王爱杰, 马俊刚, 刘瑞芳.犬传染性肝炎病毒的研究进展 [J].中国兽医科学, 2017, 47 (3): 257–264
[2] Wang C, Zhou G , Liu D et al. Detection and characterization of a novel dog hepatitis virus strain isolated from a healthy puppy in China by using whole genome sequencing [J].Vet Rec, 2015, 177: 295 –299
[3] Chen L, Yuan W , Li X et al. Inhibition effect on the replication of canine infectious